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干燥处理对促进愈伤组织分化的效果基本一致

放大字体  缩小字体 发布日期:2022-11-30  浏览次数:41
核心提示:  干燥试验分滤纸干燥和自然风干两种方式。  (1)滤纸干燥:挑选继代三次的胚性愈伤组织置于铺有三层无菌滤纸的培养皿中,一部分放在光照培养箱中进行光干

  干燥试验分滤纸干燥和自然风干两种方式。

  (1)滤纸干燥:挑选继代三次的胚性愈伤组织置于铺有三层无菌滤纸的培养皿中,一部分放在光照培养箱中进行光干燥,另一部分放在暗培养箱中进行暗干燥。干燥的天数分别为光干燥2、4、6d,暗干燥2、4、6d,然后转移到分化培养上分化成苗。(2)自然风干:挑选继代三次的胚性愈伤组织置于无菌培养皿中,打开培养皿的盖子,在超净工作台上,让愈伤组织自然风干,干燥时间为1、3、5h,然后转移到分化培养基上分化成苗。另外挑选部分未经干燥处理的愈伤组织直接转移到分化培养基上培养,作为对照,35d后计算分化率。

  结果与分析愈伤组织接入分化培养基前,对其进行干燥处理可以提高分化率,而且愈伤组织出现绿点和分化成苗的时间均会提前(绿点出现时间可提前23d,分化成苗时间可提前57d),分化进度更为统一。干燥处理对不同品种成熟胚愈伤组织分化率的影响有较大差异,对难分化的品种明恢86、优99、R527效果更为明显;对不经干燥处理已有较高分化率的品种N175、航一号分化率提高不大。光干燥与暗干燥处理对促进愈伤组织分化的效果基本一致,但光干燥处理时间太久会导致愈伤组织脱水死亡。自然风干处理的效果不如滤纸干燥,而且干燥时间难以把握,容易造成愈伤组织脱水死亡。

  滤纸干燥方式对分化率的影响,光干燥方式对分化率的影响,对于难分化的品种明恢86、优99、R527,光干燥处理可以大幅度提高分化率,分化率可提高数倍;对于本身就有较高分化率的品种N175、航一号,光干燥处理也会提高分化率,只是效果相对低些。光干燥处理的时间不宜过长,否则会使愈伤组织的分化率反而下降,甚至会使愈伤组织脱水褐化死亡。综合光干燥处理对各个品种分化率的影响来看,光干燥处理的天数以24d为好。

  处理方法干燥时间分化率,对照光干燥暗干燥自然风干暗干燥方式对分化率的影响从表1可以看出,暗干燥处理对愈伤组织分化率的影响与光干燥处理基本相似,但是暗干燥处理的时间应该比光干燥长2d左右,*佳处理时间为46d.暗干燥处理时间过长,也会使愈伤组织的分化率下降,但并不会使愈伤组织脱水死亡。

  自然风干方式对分化率的影响从表1可以看出,自然风干处理也可以使愈伤组织的分化率显著提高,但是自然风干处理的时间只能以小时计算。从表中可以发现,当自然风干处理的时间达到5h的时候,愈伤组织的分化率为0,这时愈伤组织全部脱水死亡。因此,愈伤组织自然风干处理的*佳时间是1h左右,即自然风干处理的失水速率是滤纸干燥处理的40倍左右。

  讨论试验采用滤纸和自然风干两种处理方法对水稻愈伤组织在分化前进行干燥处理,结果表明两种干燥处理均能显著提高愈伤组织的分化率。自然风干干燥处理虽然具有快速干燥、处理时间短的特点,但其处理的效果不如滤纸干燥理想,而且处理时间难以把握,容易造成愈伤组织的脱水死亡。这可能是因为自然风干处理使水稻愈伤组织快速失水,对细胞的损伤较大。

  愈伤组织干燥处理促进愈伤组织芽的分化,这作用机理目前尚未清楚,田文忠等、赵成章等研究认为对愈伤组织在分化前进行干燥处理,不仅能吸收愈伤组织内的水分,使分化率显著提高,而且愈伤组织在干燥的滤纸上处于饥饿状态,一旦转接到新鲜的分化培养基上,有利于愈伤组织细胞对培养基中养分的吸收和利用。

 
 
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